TMTpro試劑代表了進一步改進蛋白質組學中樣品多重化的強大起點。其中有幾個值得注意的優點:(1)蛋白質組檢測深度顯著,通過分餾分從細胞或組織中檢測蛋白通常超過8000個;(2)穩定的同位素標記直接支持多重化,同時提供高度準確的相對定量;(3)統計推斷可以在整個系統中得到更大的應用;(4)可以適用更復雜的實驗設計(例如可以在一個TMTpro實驗中安排更多數量的處理和重復實驗)??傊?,新一代TMTpro將推動定量蛋白質組學技術達到前所未有的高通量和覆蓋深度。


TMTpro 16plex技術原理

TMTpro 16plex標簽同常規的TMT 6標、10標一樣,由三部分組成:分子量報告子、分子量標準化部分和反應基團。TMTpro 16plex試劑通過反應基團能夠高效地標記酶解后的肽段。在一級質譜圖中,分子量標準化部分使任何一種TMTpro 16plex試劑標記的不同樣本中的同一肽段表現為相同的質荷比。在串聯質譜中,可剪切臂能夠優先斷裂以便釋放分子量報告子。每個報告子都有各自獨特的分子量,并且能夠在MS/MS分析中反應出所標記的多肽的樣品豐度,根據報告離子的信號強度值可獲得樣品間相同肽段的定量信息,再經過軟件處理得到蛋白質的定量信息。

TMTpro 16plex標簽結構示意圖


TMTpro 16plex試劑工作流程



數據分析流程


技術優勢
靈敏度高:可檢測出低豐度蛋白
分離能力強:可分離出酸/堿性蛋白,小于10KD或大于200KD的蛋白、難溶性蛋白等;
適用范圍廣:可以對任何類型的蛋白質進行鑒定,包括膜蛋白、核蛋白和胞外蛋白等;
高通量:可同時對16個樣本進行分析,特別適用于采用多種處理方式或來自多個處理時間的樣本的差異蛋白分析; 
結果可靠:定性與定量同步進行,同時給出每一個組分的相對表達水平、分子量和豐富的結構信息;
自動化程度高:液質連用,自動化操作,分析速度快,分離效果好。


應用領域
科研:研究特定疾病發生的遺傳變異,如單基因遺傳病、罕見疾病基因檢測等。
農業:用于品系鑒定、優勢性狀篩選、群體遺傳學分析、親緣關系分析等
動植物:動植物生長發育、抗病、抗逆機制研究以及育種研究。同時可實時更新和補充關聯信息的完整性
醫學:闡釋疾病的發生發展機制,發現與疾病相關的生物標志物,以應用于疾病診斷、治療、預后及用藥研究。

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